1.無菌操作室滅菌
        由于無菌操作室的污染來源主要是空氣中的細菌和真菌孢子，因此長期停用后的無菌操作室應進行熏蒸滅菌，熏蒸是用高錳酸鉀+甲醛[(2mL甲醛+1g高錳酸鉀)/m3]進行無菌室的滅菌。經常使用的無菌操作室，在每次使用前都應進行地面衛生清潔，并用紫外線燈照射30min，進行空氣滅菌。對超凈工作臺，每次操作前用紫外燈照射30min，然后用70%～75%酒精擦拭。
2.培養液滅菌
      培養液在制備過程中帶有各種雜菌，分裝后應立即滅菌，至少也應在4小時內完成滅菌工序。目前常用過濾除菌法除去培養物操作液和培養液中的細菌?；驅ε囵B液中耐熱組分先進行高壓蒸汽滅菌，然后在無菌室加入經過過濾除菌的不耐熱溶液，混勻后分裝備用。
使用高壓蒸汽滅菌器滅菌時，將分裝好的培養液放入底部有一定量(淹沒加熱管)涼水的高壓蒸汽滅菌器內，增壓至0.035~0.040 MPa時排凈滅菌器內冷空氣，以便使蒸汽能到達各個消毒部位，保證消毒滅菌徹底。然后繼續加壓加熱，當壓力表讀數達到0.10~0.11MPa為121℃，保持15~20min即可。由于消毒滅菌效果取決于溫度而不是壓力，所以在一定壓力下保持較長的消毒滅菌時間是必須的。
      消毒滅菌結束后，關閉熱源，只有當滅菌器內壓力降為零時才能打開放氣閥，排除剩余蒸汽，取出培養液。不可在壓力較高時打開放氣閥，引起減壓沸騰，使容器中液體溢出。培養液組成中如含有遇熱易分解的物質，則需用過濾方法消毒滅菌。首先對培養液中耐熱組分進行高壓蒸汽滅菌后放置在無菌場所，固體培養液在40℃左右瓊脂即將凝結前，加入經過過濾除菌的不耐熱溶液，混勻后冷卻備用。