一、化學指示劑法
       原理：化學指示劑在一定溫度與作用時間下，會受熱變色或變形，根據這一特點來判斷是否達到需要的滅菌參數。
二、留點溫度計法
      原理：留點溫度計法是利用水銀溫度計不回流的特性，其原理跟傳統體溫計相似，可以指示滅菌器在滅菌過程中達到的最高溫度。
三、自制測溫管法
      原理：利用一些化學藥品受熱熔化后再冷卻，晶體的外形不同的特性，把化學藥品密封在小玻璃管內，滅菌時放在滅菌器里，滅菌完后觀察晶體的形狀，就可以判斷溫度是否達標。
四、生物指示劑法
      原理：利用非致病性的嗜熱脂肪桿菌的芽孢作為指示菌，來測定熱力滅菌的效果。嗜熱脂肪桿菌的芽孢對熱的抗性較強，其耐熱能力與病原微生物肉毒梭菌芽孢相似，以此為指示菌，驗證滅菌器能否達到滅菌要求。
      生物指示劑分為三種：芽孢懸液、芽胞菌片、菌片和培養基混合指示管。一般放在滅菌容器的5個點：下層的前、中、后和上層、中層的中央點。滅菌后取指示劑接種到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白胨水中，55-60℃培養2-7天，若培養基澄清、顏色沒有變化即說明芽孢被殺死，滅菌器滅菌效果良好；如果培養基黃色渾濁，說明芽孢未被殺滅，滅菌器滅菌效果不合格。芽孢懸液和芽孢菌片的驗證方法均是如此。